Название: Клиническая оценка результатов лабораторных исследований - Учебное пособие

Жанр: Медицина

Рейтинг:

Просмотров: 1389

Страница: | 1 | 2 | 3 | 4 | 5 | 6 | 7 | 8 | 9 | 10 | 11 | 12 | 13 | 14 | 15 | 16 | 17 | 18 | 19 | 20 | 21 | 22 | 23 | 24 | 25 | 26 | 27 | 28 | 29 | 30 | 31 | 32 | 33 | 34 | 35 | 36 | 37 | 38 | 39 | 40 | 41 | 42 | 43 | 44 | 45 | 46 | 47 | 48 | 49 | 50 | 51 | 52 | 53 | 54 | 55 | 56 | 57 | 58 | 59 | 60 | 61 | 62 |



СЕРОЛОГИЧЕСКАЯ ДИАГНОСТИКА ВИРУСНЫХ ИНФЕКЦИЙ

ВИЧ-инфекция

ВИЧ-инфекция — заболевание, вызываемое вирусом иммунодефицита человека (ВИЧ), длительное время персистирующего в лимфоцитах, макрофагах, клетках нервной ткани, в результате чего развивается медленно прогрессирующее поражение иммунной и нервной систем организма, проявляющееся вторичными инфекциями, опухолями, подострым энцефалитом и другими патологическими изменениями.

Возбудители — вирусы иммунодефицита человека 1-го и 2-го типов — ВИЧ-1, ВИЧ-2 (HIV-I, HIV-2, Human Immunodeficiency viruses, types I, II) — относятся к семейству ретро-вирусов, подсемейству медленных вирусов. Вирионы являются сферическими частицами диаметром 100—140 нм. Вирусная частица имеет наружную фосфолипидную оболочку, включающую гликопротеины (структурные белки) с определенной молекулярной массой, измеряемой в килодальтонах. У ВИЧ-1 — это gp 160, gp 120, gp 41. Внутренняя оболочка вируса, покрывающая ядро, также представлена белками с известной молекулярной массой — р 17, р 24, р 55 (ВИЧ-2 содержит gp 140, gp 105, gp 36, р 16, р 25, р 55).

В состав генома ВИЧ входит РНК и фермент обратной транскриптазы (ревертазы). Для того чтобы геном ретровируса соединился с геномом клетки хозяина, вначале с помощью ревертазы происходит синтез ДНК на матрице вирусной РНК. Затем ДНК провируса встраивается в геном клетки-хозяина. ВИЧ обладает выраженной антигенной изменчивостью, значительно превышающий таковую у вируса гриппа.

В организме человека основной мишенью ВИЧ являются Т-лимфоциты, несущие на поверхности наибольшее количество СО4-рецепторов. После проникновения ВИЧ в клетку с помощью ревертазы по образцу своей РНК вирус синтезирует ДНК, которая встраивается в генетический аппарат клетки-хозяина (Т-лимфоциты) и остается там пожизненно в состоянии провируса. Помимо Т-лимфоцитов-хелперов, поражаются макрофаги, В-лимфоциты, клетки нейроглии, слизистой оболочки кишечника и некоторые другие клетки. Причиной снижения количества Т-лимфоцитов (клетки CD4) является не только прямое цитопатическое действие вируса, но и их слияние с неинфицированными клетками. Наряду с поражением Т-лимфоцитов у больных ВИЧ-инфекцией отмечается поликлональная активация В-лимфоцитов с увеличением синтеза иммуноглобулинов всех классов, особенно IgG и IgA, и последующим истощением этого отдела иммунной системы. Нарушение регуляции иммунных процессов проявляется также повышением уровня альфа-интерферона, бета-2-микроглобулина, снижением уровня интерлейкина-2. В результате нарушения функции иммунной системы, особенно при снижении числа Т-лимфоцитов (CD4) до 400 и менее клеток в 1 мкл крови, возникают условия для неконтролируемой репликации ВИЧ со значительным увеличением количества вирионов в

354

различных средах организма. В результате поражения многих звеньев иммунной системы человек, зараженный ВИЧ, становится беззащитным перед возбудителями различных инфекций. На фоне нарастающей иммунодепрессии развиваются тяжелые прогрессирующие болезни, которые не встречаются у человека с нормально функционирующей иммунной системой. Эти болезни ВОЗ определила как СПИД-маркерные (индикаторные).

Первая группа — заболевания, которые присущи только тяжелому иммунодефициту (уровень CD4 ниже 200). Клинический диагноз ставят при отсутствии анти-ВИЧ антител или ВИЧ-антигенов.

Вторая группа — заболевания, развивающиеся как на фоне тяжелого иммунодефицита, так и в ряде случаев без него. Поэтому в таких случаях необходимо лабораторное подтверждение диагноза.

СПИД-индикаторные болезни

Первая группа:

кандидоз пищевода, трахеи, бронхов;

внелегочный криптококкоз;

криптоспоридиоз с диареей более 1 мес;

цитомегаловирусные поражения различных органов, помимо печени, селезенки или лимфатических узлов у больного старше 1 мес;

инфекция, обусловленная вирусом простого герпеса, проявляющаяся язвами на коже и слизистых оболочках, которые персистируют более 1 мес, а также бронхитом, пневмо нией или эзофагитом любой продолжительности, поражающим больного в возрасте старше 1 мес;

генерализованная саркома Капоши у больных моложе 60 лет;

лимфома головного мозга (первичная) у больных моложе 60 лет;

лимфоцитарная интерстициальная пневмония и/или легочная лимфоидная дисплазия у детей в возрасте до 12 лет;

диссеминированная инфекция, вызванная атипичными микобактериями (микобакте- рии комплекса M.avium-intracellulare) с внелегочной локализацией или локализацией (дополнительно к легким) в коже, шейных лимфатических узлах, лимфатических узлах корней легких;

пневмоцистная пневмония;

прогрессирующая многоочаговая лейкоэнцефалопатия;

токсоплазмоз головного мозга у больного старше 1 мес.

Вторая группа:

•              бактериальные инфекции, сочетанные или рецидивирующие у детей до 13 лет (более двух случаев за 2 года наблюдения): сепсис, пневмония, менингит, поражение костей или суставов, абсцессы, обусловленные гемофильными палочками, стрептококками; кокцидиоидомикоз диссеминированный (внелегочная локализация); ВИЧ-энцефалопатия («ВИЧ-деменция», «СПИД-деменция»);

гистоплазмоз с диареей, персистирующей более 1 мес; изоспороз с диареей, персистирующей более 1 мес; саркома Капоши в любом возрасте;

лимфома головного мозга (первичная) у лиц любого возраста;

другие В-клеточные лимфомы (за исключением болезни Ходжкина) или лимфомы неизвестного иммунофенотипа:

а)            мелкоклеточные лимфомы (типа лимфомы Беркитта и др.);

б)            иммунобластные саркомы (лимфомы иммунобластные, крупноклеточные, диффуз ные гистиоцитарные, диффузные недифференцированные);

микобактериоз диссеминированный (не туберкулез) с поражением, помимо легких, кожи, шейных или прикорневых лимфоузлов;

туберкулез внелегочной (с поражением внутренних органов, помимо легких);

сальмонелезная септицемия, рецидивирующая;

ВИЧ-дистрофия (истощение, резкое похудание).

Существуют многочисленные классификации СПИДа. Согласно новой классификации, предложенной Центром по контролю за заболеваниями в США (табл. 8.3), диагноз СПИДа устанавливается лицам, имеющим уровень СБ4-лимфоцитов ниже 200 в 1 мкл крови даже при отсутствии СПИД-индикаторных болезней.

 

23*

355

Таблица 8.3.  Классификация СПИДа

 

Уровень CD4 Т-клеток в 1 мкл крови

Клинические категории

 

А — бессимптомная острая (первичная) ВИЧ-инфекция или ПГЛ

В — манифестная, но не А и не С

С — СПИД-индикаторные состояния

>500 200-400 <200

А1 А2 A3

В1 В2 ВЗ

С1 С2 СЗ

Категория А включает бессимптомных ВИЧ-серопозитивных лиц, лиц с периферической генерализованной лимфаденопатией (ПГЛ), а также острой первичной ВИЧ-инфекцией.

Категория В включает различные синдромы, важнейшие из которых — бациллярный ангиоматоз, орофарингеальный кандидоз, рецидивирующий кандидозный вульвовагинит, трудно поддающийся терапии, цервикальная дисплазия, цервикальная карцинома, идиопа-тическая тромбоцитопеническая пурпура, листериоз, периферическая нейропатия.

Антитела к ВИЧ в сыворотке

Антитела к ВИЧ в сыворотке крови в норме отсутствуют.

Определение антител к вирусу иммунодефицита человека является основным методом лабораторной диагностики ВИЧ-инфекции. В основе метода лежит иммуноферментный анализ. Антитела к ВИЧ появляются у 90—95 % инфицированных в течение 3 мес после заражения, у 5—9 % — через 6 мес и 0,5—1 % — в более поздние сроки [Кожемякин Л.А. и др., 1990]. В стадии СПИДа количество антител может снижаться вплоть до полного исчезновения. При получении положительного ответа — выявлении антител к ВИЧ — во избежании ложноположительных результатов анализ должен быть повторен еще один или два раза, желательно с использованием диагностикума другой серии. Положительным считается результат в том случае, если из двух — оба или из трех — два анализа отчетливо выявили антитела.

 

Иммуноблотинг на антитела к вирусным белкам ВИЧ

в сыворотке

Антитела к вирусным белкам ВИЧ в сыворотке в норме отсутствуют.

Метод иммуноферментного анализа по определению антител к ВИЧ является скринин-говым. При получении положительного результата для подтверждения его специфичности используют метод иммуноблотинга Western-blot — встречная преципитация в геле антител в сыворотке крови больного с различными вирусными белками, подвергнутыми разделению по молекулярной массе с помощью электрофореза и нанесенными на нитроцеллюлозу. Определяются антитела к вирусным белкам gp 41, gp 120, gp 160, р 24, р 18, р 17 и др.

По рекомендации Российского центра по профилактике и борьбе со СПИДом обнаружение антител к одному из гликопротеинов — gp 41, gp 120, gp 160 — следует считать положительным результатом. В случае обнаружения антител к другим белкам вируса результат считается сомнительным, и такого человека следует обследовать еще дважды: через 3 и 6 мес. Отсутствие антител к специфическим белкам ВИЧ означает, что иммуноферментный метод дал ложноположительный результат. Вместе с тем в практической работе при оценке результатов метода иммуноблотинга необходимо руководствоваться инструкцией, прилагаемой фирмой к используемому набору для иммуноблотинга.

Метод иммуноблотинга применяется для лабораторной диагностики ВИЧ-инфекции.

Вирусные гепатиты

В настоящее время выделяют следующие формы вирусных гепатитов: гепатит А, гепатит В, гепатит С, гепатит D и гепатит Е. Для диагностики каждой из перечисленных форм вирусных гепатитов используют определенный перечень маркеров.

356

II

Вирусный гепатит А

Гепатит А (ГА, hepatitis A) — острая энтеровирусная инфекция. Возбудитель — вирус гепатита А (ВГА, HAV) — энтеровирус типа 72. Геном вируса представлен однонитчатой РНК. Вирус гепатита А содержит единственный антиген (HA-Ag). Удельный вес гепатита А в суммарной заболеваемости вирусными гепатитами составляет 70—80 %. В структуре заболеваемости гепатитом А дети составляют до 80 %, причем основная масса — дошкольники и школьники начальных классов.

Антитела IgM к вирусу гепатита А в сыворотке

Антитела IgM к вирусу гепатита А в сыворотке в норме отсутствуют.

Достоверное подтверждение диагноза ГА достигается серологическими методами — обнаружением нарастания уровня специфических антител (анти-HAV), принадлежащих к иммуноглобулинам класса М (анти-HAV IgM). При гепатите А нарастание уровня антител, относящихся к IgM, начинается еще в инкубационном периоде, за 5—10 дней до появления первых симптомов болезни, и быстро прогрессирует. К моменту первичного обращения больного к врачу уровень анти-HAV IgM успевает достичь высоких показателей, чтобы быть выявленным методом ИФА. Общепринято, что анти-HAV IgM у больных обнаруживаются в начале клинических проявлений заболевания и сохраняются до 6 мес после перенесенной инфекции.

Определение анти-HAV IgM — основной тест специфической диагностики гепатита А. Нарастание анти-HAV IgG происходит в более поздние сроки — в фазу реконвалесценции — и поэтому не может служить критерием ранней диагностики гепатита А. Выявление анти-HAV IgG у здоровых людей (возможно у 30—60 % здорового населения) свидетельствует о предыдущей инфекции и иммунитете (ретроспективная диагностика).

Антиген гепатита А — HA-Ag — появляется в сыворотке крови в конце преджелтушного периода. У большинства больных сохраняется в сыворотке крови на протяжение 1—2 нед заболевания. Из-за кратковременности пребывания в сыворотке крови больного для диагностических целей не используется.

Вирусный гепатит В

Гепатит В — вирусная антропонозная инфекция. Возбудитель — вирус гепатита В (ВГВ, HBV) — относится к семейству гепаднавирусов, ДНК-содержащих вирусов, поражающих клетки печени. Вирионы ВГВ имеют наружную липопротеидную оболочку и нуклеокапсид, содержащий двунитчатую циркулярную ДНК и ДНК-зависимую ДНК-полимеразу. На рис. 8.2 представлены антигенная структура вириона и маркеры вирусного гепатита В.

В структуре ВГВ выделяют следующие антигенные системы:

поверхностный («австралийский») антиген, HBsAg — находится в составе липопротеид- ной оболочки ВГВ, является маркером ВГВ, указывая на инфицированность вирусом;

ядерный (core), HBcAg — обнаруживается в составе нуклеокапсида вирионов, свиде тельствует об активной репродукции вируса;

HBeAg — входит в состав ядра ВГВ, указывая на активность вируса и, кроме того, на его высокую вирулентность и инфекционность;

HBxAg — расположен вблизи оболочки вириона; его роль в генезе инфекции изучается.

В диагностике вирусного гепатита В ведущее значение имеет определение комплекса маркеров гепатита. Свыше 5 % населения планеты охвачено этой инфекцией, а частота безжелтушных форм вирусного гепатита В составляет, по данным разных авторов, от 60 до 82 %.

Поверхностный антиген (HBsAg) гепатита В в сыворотке

Поверхностный антиген гепатита В в сыворотке в норме отсутствует.

Обнаружение поверхностного антигена (HBsAg) гепатита В в сыворотке подтверждает острое или хроническое инфицирование вирусом гепатита В (HBV).

При остром заболевании HBsAg выявляется в сыворотке крови в последние 1—2 нед инкубационного периода и в первые 2—3 нед клинического периода. Циркуляция HBsAg в крови может ограничиваться несколькими днями, поэтому следует стремиться к раннему

357

 

Рнс. 8.2. Антигенная структура вирнона вирусного гепатита В.

— наружная оболочка — поверхностный антиген (HBsAg);

— антиген с (HBcAg) — коровский или ядерный антиген;

— антиген с (HBeAg); 4 — ДНК-полимераза, ДНК вируса

гепатита В.

 

первичному обследованию больных. Частота выявления HBsAg зависит от чувствительности используемого метода исследования. Метод ИФА позволяет выявить HBsAg более чем у 90 % больных. Почти у 5 % больных самые чувствительные методы исследования не обнаруживают HBsAg, в таких случаях этиология вирусного гепатита В подтверждается наличием анти-HBcAg IgM. Концентрация HBsAg в сыворотке крови при всех формах тяжести гепатита В в разгар заболевания имеет значительный диапазон колебаний, вместе с тем имеется определенная закономерность: в остром периоде существует обратная связь между концентрацией HBsAg в сыворотке и тяжестью болезни. Высокая концентрация HBsAg чаще наблюдается при легких и среднетяжелых формах болезни. При тяжелых и злокачественных формах концентрация HBsAg в крови чаще низкая, причем у 20 % больных с тяжелой формой и 30 % со злокачественной антиген в крови может вообще не обнаруживаться. Появление на этом фоне у больных антител к HBsAg расценивается как неблагоприятный прогностический признак; он определяется при злокачественных формах (фульминантных) гепатита В.

При остром течении гепатита В концентрация HBsAg в крови постепенно снижается вплоть до полного исчезновения этого антигена. HBsAg исчезает у большинства больных в течение 3 мес от начала острой инфекции. Снижение концентрации HBsAg более чем на 50 % к концу 3-й недели острого периода, как правило, свидетельствует о близком завершении инфекционного процесса. Обычно у больных с высокой концентрацией HBsAg в разгар болезни он обнаруживается в крови в течение нескольких месяцев. У больных с низкой концентрацией HBsAg исчезает значительно раньше (иногда через несколько дней после начала заболевания). В целом срок обнаружения HBsAg колеблется от нескольких дней до 4—5 мес. Максимальный срок обнаружения HBsAg при гладком течении острого гепатита В не превышает 6 мес от начала заболевания.

HBsAg может быть выявлен у практически здоровых людей, как правило, при профилактических или случайных исследованиях. В таких случаях исследуют другие маркеры вирусного гепатита В — анти-HBcAg IgM, анти-НВс IgG, анти-HBeAg и изучают функцию печени. При отрицательных результатах необходимы повторные исследования на HBsAg. Если повторные исследования крови в течение более 3 мес выявляют HBsAg, такого человека относят к хроническим носителям поверхностного антигена. Носительство HBsAg — довольно распространенное явление. В мире насчитывается более 300 млн носителей; у нас в стране — около 10 млн [Соринсон С.Н., 1987].

Исследование крови на наличие HBsAg применяют в следующих целях:

•              для диагностики острого гепатита В:

инкубационный период;

острый период заболевания;

ранняя стадия реконвалесценции.

для диагностики хронического носительства вируса гепатита В;

при заболеваниях:

 

 

358

персистирующем хроническом гепатите;

циррозе печени.

• для скрининга, выявления больных в группах риска:

больные с частыми гемотрансфузиями;

больные с хронической почечной недостаточностью;

больные с множественным гемодиализом;

больные с иммунодефицитными состояниями, в том числе СПИДом.

Антитела к HBsAg (анти-HBsAg) гепатита В в сыворотке

В норме анти-HBsAg в сыворотке отсутствуют.

Антитела к поверхностному антигену гепатита В — анти-HBsAg — обнаруживаются в конце острого периода вирусного гепатита В или, чаще всего, через 3 мес от начала инфекции, изредка позже (до года) и сохраняются долго, в среднем 5 лет [Хазанов А.И., 1988]. Анти-HBsAg обнаруживаются не сразу после исчезновения HBsAg. Продолжительность фазы «окна» варьирует от нескольких недель до нескольких месяцев. Антитела к поверхностному антигену гепатита В нейтрализуют вирус и рассматриваются как признак иммунитета. Они относятся к классу IgG. Определение анти-HBsAg имеет важное значение для оценки течения гепатита В и его исходов, так как характеризует иммунный ответ конкретного больного. Это надежный критерий развития постинфекционного иммунитета и выздоровления. Выявление анти-HBsAg может служить критерием ретроспективной диагностики гепатита ранее не уточненной этиологии. Анти-HBsAg свидетельствуют о ранее перенесенной инфекции.

Выявление антител к HBsAg играет важную роль в определении контингента для вакцинации против гепатита В. Согласно рекомендациям ВОЗ, если уровень анти-HBsAg составляет менее 10 мМЕ/л, таким лицам показана вакцинация против гепатита В, при уровне 10— 100 мМЕ/л вакцинация должна быть отложена на один год, при уровне более 100 мМЕ/л вакцинация показана через 5—7 лет.

Исследование крови на наличие антител к HBsAg применяют в следующих целях:

диагностика вирусного гепатита В в позднюю стадию реконвалесценции.

ретроспективная диагностика перенесенного вирусного гепатита В.

диагностика анти-ИВя-положительного хронического гепатита.

диагностика персистирующего хронического гепатита.

оценка напряженности иммунитета после вакцинации вакциной против гепатита В.

Общие антитела к ядерному антигену гепатита В (анти-HBcAg) в сыворотке

Анти-HBcAg в сыворотке в норме отсутствуют.

HBcAg обнаруживается только в ядрах гепатоцитов. В крови в свободном виде HBcAg не выявляется. Ядерное расположение HBcAg, близкое к ядру вируса, определяет его высокую иммуногенность. Антитела к ядерному антигену гепатита В появляются первыми среди других антител, связанных с гепатитом В в сыворотке крови больных острым и хроническим вирусным гепатитом В, а также у реконвалесцентов. Общие антитела к ядерному антигену гепатита В состоят из иммуноглобулинов класса М и G. Определение общих антител к ядерному антигену гепатита В может использоваться только для ретроспективной диагностики гепатита В, так как у 5—10 % больных исследования на HBsAg дают отрицательный результат. Для того чтобы установить, в какой стадии развития находится гепатит В, необходимо дополнительное определение антител IgM. Антитела класса IgM — маркер активной репликации вируса, т.е. острой инфекции, а антитела класса IgG — перенесенной инфекции.

Антитела IgM к ядерному антигену гепатита В (анти-HBcAg IgM) в сыворотке

Анти-HBcAg IgM в сыворотке в норме отсутствуют.

Анти-HBcAg IgM обнаруживаются уже в начале острой фазы болезни, еще до появления или в первые дни желтухи, иногда даже в конце инкубации. Выявление анти-HBcAg IgM  расценивают как убедительный  критерий диагностики  гепатита  В,  особенно при

359

отрицательных результатах исследования на HBsAg. Анти-HBcAg IgM циркулируют в крови больных в течение нескольких месяцев (2—5 мес) до периода реконвалесценции, а затем исчезают, что рассматривается как признак очищения организма от вируса гепатита В.

Исследование крови на наличие анти-HBcAg IgM применяется в следующих целях:

диагностика острого периода гепатита В;

диагностика периода реконвалесценции гепатита В;

диагностика анти-НВв-положительного хронического гепатита;

диагностика хронического носительства вируса гепатита В.

Антитела IgG к ядерному антигену гепатита В (анти-HBcAg IgG) в сыворотке

Анти-HBcAg IgG в сыворотке в норме отсутствуют.

У больных анти-HBcAg IgG появляются в острый период вирусного гепатита В и сохраняются на протяжении всей жизни. Анти-HBcAg IgG — ведущий маркер перенесенного гепатита В.

Исследование крови на наличие анти-HBcAg IgG применяется в следующих целях:

диагностика хронического носительства вируса гепатита В при наличии HBs-антигена в сыворотке крови;

диагностика перенесенного вирусного гепатита В.

HBeAg-антиген гепатита В в сыворотке

HBeAg-антиген в сыворотке в норме отсутствует.

HBeAg можно обнаружить в сыворотке крови большинства больных острым вирусным гепатитом В. Он обычно исчезает из крови раньше HBs-антигена. Высокий уровень HBeAg в первые недели заболевания или обнаружение его на протяжении более 8 нед дает основание заподозрить хроническую инфекцию. Этот антиген часто обнаруживается при хроническом активном гепатите вирусной этиологии. Особый интерес к определению HBeAg связан с тем, что его обнаружение характеризует активную репликативную фазу инфекционного процесса. Установлено, что высокие концентрации HBeAg соответствуют высокой ДНК-полимеразной активности и характеризуют активную репликацию вируса. Наличие HBeAg в крови свидетельствует о высокой ее инфекциозности, т.е. присутствии в организме обследуемого активной инфекции гепатита В и обнаруживается только в случае присутствия в крови HBs-антигена. У больных хроническим активным гепатитом противовирусные препараты применяют только при обнаружении в крови HBeAg.

Наличие НВе-антигена свидетельствует о продолжающейся репликации вируса и инфекциозности больного. HBeAg-антиген — маркер острой фазы и репликации вируса гепатита В.

Исследование крови на наличие НВе-антигена применяют в следующих целях:

диагностика инкубационного периода вирусного гепатита В;

диагностика продромального периода вирусного гепатита В;

диагностика острого периода вирусного гепатита В;

диагностика хронического персистирующего вирусного гепатита В.

Антитела к HBeAg гепатита В (анти-HBeAg) в сыворотке

Анти-HBeAg в сыворотке в норме отсутствуют.

Появление aHTH-HBeAg-антител указывает обычно на интенсивное выведение из организма вируса гепатита В и незначительное инфицирование больного. Эти антитела появляются в острый период и сохраняются до 5 лет после перенесенной инфекции. При хроническом персистирующем гепатите анти-HBeAg обнаруживаются в крови больного вместе с HBsAg. Сероконверсия, т.е. переход HBeAg в анти-HBeAg при хроническом активном гепа-

360

тите, чаще прогностически благоприятна, но такая же сероконверсия при выраженной цир-ротической трансформации печени прогноза не улучшает.

Исследование крови на наличие анти-HBeAg применяют в следующих целях:

•              диагностика вирусного гепатита В:

начальная стадия заболевания,

острый период инфекции,

ранняя стадия реконвалесценции,

реконвалесценция,

поздняя стадия реконвалесценции;

диагностика перенесенного вирусного гепатита В в недалеком прошлом;

диагностика хронического персистирующего вирусного гепатита В.

Вирусный гепатит С

Гепатит С (ГС, hepatitis С) — вирусное заболевание, наиболее часто протекающее в виде посттрансфузионного гепатита с преобладанием безжелтушных и легких форм и склонное к хронизации процесса. Возбудитель — вирус гепатита С (ВГС) — имеет сходство с флавови-русами, содержит РНК.

Примерно 90 % всех случаев посттрансфузионных гепатитов связаны с ВГС. Среди доноров антитела к вирусу гепатита С (анти-ВГС) обнаруживают в 0,2—5 % случаев. У 40— 75 % пациентов регистрируется бессимптомная форма болезни, у 50—75 % больных острым ВГС формируется хронический гепатит, у 20 % из них развивается цирроз печени. Важная роль ВГС отводится и в этиологии гепатоклеточной карциномы.

Антитела к вирусу гепатита С в сыворотке

Антитела к вирусу гепатита С в сыворотке в норме отсутствуют.

Диагностика гепатита С основана на обнаружении суммарных антител к ВГС методом ИФА, которые появляются в первые 2 нед заболевания и свидетельствуют о возможной ин-фицированности вирусом или перенесенной инфекции. Анти-ВГС-антитела могут сохраняться в крови реконвалесцентов на протяжении 8—10 лет с постепенным снижением их концентрации. Возможно позднее обнаружение антител спустя год и более после инфицирования. При хроническом гепатите С антитела определяются постоянно и в более высоких титрах. Существующие в настоящее время тест-системы для диагностики ВГС основаны на определении антител класса IgG, поэтому разрабатываются тест-системы нового поколения, которые позволят верифицировать активную инфекцию (определять антитела класса IgM). Антитела класса IgM могут выявляться не только при остром ВГС, но и при хроническом гепатите С. Снижение их уровня в процессе лечения больных хроническим гепатитом С может свидетельствовать об эффективности лекарственной терапии. Обнаружение антител к ВГС методом ИФА требует подтверждения способом иммуноблотинга для исключения ложнопо-ложительного результата исследования.

Определение антител к вирусу гепатита С используют для диагностики острого и хронического гепатита С, персистирующего хронического гепатита. Вирус гепатита С может быть причиной развития цирроза и рака печени, поэтому данное исследование показано при этих заболеваниях.

 

Иммуноблотинг на антитела к белкам вируса гепатита С

в сыворотке

 

 

Антитела к вирусу гепатита С в норме отсутствуют.

Метод иммуноферментного анализа, применяемый для определения антител к ВГС, является скрининговым. В случае получения положительного результата для подтверждения его специфичности используют метод иммуноблотинга Western-blot — встречную преципитацию в геле антител в сыворотке крови больного с различными вирусными белками, подвергнутыми разделению по молекулярной массе с помощью электрофореза и нанесенными на нитроцеллюлозу. Исследование считается положительным, если выявляются антитела к

361

белкам интенсивностью +1 к 2 или более антителам ВГС. Специфичными для ВГС являются антитела к белкам — Core, NS3-1, NS3-2, NS1, NS5.

Иммуноблотинг на вирус гепатита С служит подтверждающим тестом специфичности метода И ФА.

Вирусный гепатит D

Гепатит D — вирусная инфекция, протекающая вследствие биологических особенностей вируса исключительно в виде ко- или суперинфекции при гепатите В, характеризующаяся тяжелым течением часто с неблагоприятным исходом.

Возбудитель — вирус гепатита D (BFD) — по своим биологическим свойствам приближается к вироидам — обнаженным молекулам нуклеиновых кислот. Печень человека — единственное место репликации BFD. Известно существование двух вариантов инфекции: коинфекция (одновременное заражение ВГВ и BFD) и суперинфекция (заражение HBsAg-позитивных пациентов). Сочетание ВГВ и BFD сопровождается развитием более тяжелых форм патологического процесса, что определяется главным образом действием BFD. Летальность при суперинфекции достигает 5—20 %. Инфицирование дельта-вирусом может вызывать острое заболевание, заканчивающееся выздоровлением, или формировать хроническое носительство BTD.

При гепатите D могут отсутствовать в крови маркеры гепатита В — анти-НВс и HBs-антиген — и наблюдается угнетение ДНК-полимеразной активности, так как BFD ингибиру-ет репликацию вируса гепатита В.

Антитела IgM к вирусу гепатита D в сыворотке

Антитела IgM к вирусу гепатита D в сыворотке в норме отсутствуют.

Антитела BFD IgM (анти-BFD IgM) появляются в острый период «дельта-инфекции». По мере выздоровления при BFD происходит элиминация вируса из печени и исчезновение анти-BFD IgM. При хронизации процесса наблюдается персистирование BFD в ткани печени и анти-BFD IgM в высокой концентрации в крови. Антитела BFD IgM говорят об активной репликации вируса.

Антитела IgG к вирусу гепатита D в сыворотке

Антитела IgG к вирусу гепатита D в сыворотке в норме отсутствуют.

Антитела BFD IgG (анти-BFD IgG) появляются в период реконвалесценции, и их концентрация постепенно снижается в течение нескольких месяцев. Определение антител BFD IgG может служить критерием ретроспективной диагностики гепатита ранее не уточненной этиологии.

Применение метода определения антител IgG к вирусу гепатита D:

диагностика острого вирусного гепатита D — период реконвалесценции;

диагностика хронического персистирующего гепатита;

диагностика хронического носительства.

Вирусный гепатит Е

Возбудителем вирусного гепатита Е (ВГЕ) является РНК-вирус. Для заболевания характерен фекально-оральный путь передачи, преимущественно водный. Инкубационный период болезни — около 35 сут. Клиническое течение острого ВГЕ сходно с ВГА. Существенно тяжелее заболевание протекает у беременных, особенно в III триместре.

Для специфической диагностики ВГЕ используются методы ИФА, основанные на выявлении антител класса IgM. Обнаружение в крови повышенного уровня анти-ВГЕ IgM служит лабораторным подтверждением диагноза.

Клиническое применение маркеров для диагностики вирусных гепатитов, проведения дифференциальной диагностики между различными формами гепатитов, оценки стадии течения вирусных гепатитов суммированы в табл. 8.4—8.7.

362

Таблица 8.4. Клиническое применение маркеров гепатитов (наборы тестов)

 

Интерпретация результатов

Маркеры вирусного гепатита В

 

HBsAg

anti-HBc IgM

anti-HBc Total

anti-HBs

HBeAg

anti-HBe

anti-HAV IgM

anti-HAV Total

anti-HCV

Дифференциальная диагностика острого гепатита Мониторинг больных острым гепатитом В Диагностика носительства вируса гепатита В Мониторинг хронического гепатита В Обследование доноров крови Мониторинг вакцинации Дородовый скрининг Послеродовый мониторинг Эпидемиологический скрининг

+  +  +             +  +  +   +

 

 

I

+             +   +   +

I

 

+             +

+                         +   +   +   +

Таблица  8.5. Дифференциальная диагностика острых вирусных гепатитов (использование рекомендуемого набора маркеров)

 

 

 

IgM

 

IgM

 

Интерпретация

 

О

Вс-

дополнительные

результатов исследования

J

03

X

anti H

anti H

anti H

маркеры

Ранний острый или хронический ге-

+

 

 

 

анти-ВГЭ; НВе; anti-НВе; anti-

патит В

 

 

 

 

HBc total; anti-HBs

Острый гепатит В. Носительство ви-

+

 

 

+

анти-ВГО; НВе; anti-НВе; anti-

руса гепатита В

 

 

 

 

HBc total; anti-HBs

Острый или хронический гепатит С

 

 

+

 

 

Ранняя фаза острого гепатита А

 

+

 

 

 

Острый или перенесенный гепатит В

 

 

 

+

anti-HBs

Хронический гепатит В и острый или

+

 

+

 

анти-ВГО, anti-HBc total

хронический гепатит С

 

 

 

 

 

Острый или перенесенный гепатит В

 

 

+

+

анти-ВГО, anti-HBc total, АЛТ,

и острый или хронический гепатит С

 

 

 

 

повторно anti HCV

Таблица  8.6. Клиническое значение маркеров гепатитов (при обнаружении их в крови)

 

Интерпретация результатов

Маркеры вирусного гепатита В

 

I

anti-HBc IgM

anti-HBc total

anti-HBs

HBeAg

anti-HBe

anti-HAV IgM

anti-HAV total

anti-HCV

Ранняя фаза острого гепатита В Острая инфекция гепатита В Ранняя стадия реконвалесценции Хронический гепатит В без сероконверсии Хронический гепатит В с сероконверсией Стадия реконвалесценции гепатита В Поздняя стадия реконвалесценции гепатита В Перенесенный вирусный гепатит В

 

+   +              +   +

*

 

 

 

 

363

Продолжение табл. 8.6

 

Интерпретация результатов

Маркеры вирусного гепатита В

 

HBsAg

anti-HBc IgM

anti-HBc total

anti-HBs

HBeAg

anti-HBe

anti-HAV IgM

anti-HAV total

anti-HCV

Состояние после вакцинации вакциной вируса гепатита В Ранняя фаза острого гепатита А Период реконвалесценции гепатита А Состояние после вакцинации вакциной гепатита А Вирусный гепатит С

 

 

 

+

 

 

+ +

+

+

+

 

 

Таблица  8.7. Оценка стадий течения вирусного гепатита В (при выявлении HbsAg-антигена)

 

Интерпретация результатов

Маркеры вирусного гепатита В

 

HBsAg

HBeAg

анти-Н Be

анти-HBs

анти-НВс IgM

анти-НВс IgG

АлТ/АсТ

Редкий варант носительства

Инкубационный период. Начальная стадия заболевания

Продромальный период. Хроническая инфекция

Острый период вирусного гепатита. Хроническая инфекция

Ранняя стадия реконвалесценции. Хроническое носительство

Реконвалесценция

Поздняя стадия реконвалесценции. Инфекция в недалеком прошлом

Инфекция в прошлом Инфекция в далеком прошлом Состояние после вакцинации Ahth-HBs(+) хронический гепатит

it  t  t  t  Г  Г  £XXX

1     1     1     1         1         1         1         1        +       +    1

(—)

"+"+ Т"+    *+    Т    Т   Т   Т   ТТ

 

 

В норме

В норме или (+)

В норме или (+)

Повышены В норме

В норме или (+)

В норме

В норме В норме В норме Повышены

ПЕРИОДЫ ОБНАРУЖЕНИЯ В КРОВИ МАРКЕРОВ ВИРУСНОГО ГЕПАТИТА В ПРИ ОСТРОМ ПРОЦЕССЕ:

поверхностный HBs-антиген — с инкубационного периода до периода ранней рекон валесценции (5,5—6 мес);

антиген НЬе обнаруживается в инкубационный и продромальный периоды (до 3,5 мес); его выявление свидетельствует о репликации вируса;

антитела к Hbe-антигену появляются в острый период заболевания (3—4-й месяц) и сохраняются до нескольких лет;

антитела класса IgM к ядерному антигену (анти-HBc-IgM) обнаруживаются в продро мальном периоде и сохраняются до периода реконвалесценции (со 2-го по 6-й месяц заболевания);

антитела класса IgG к ядерному антигену (анти-HBc-IgG) возникают в продромаль ном периоде и сохраняются на протяжении всей жизни (ведущий маркер вирусного гепатита В);

антитела к поверхностному Hbs-антигену (анти-HBs) появляются в стадии поздней реконвалесценции (6-й месяц) и сохраняются до 5 лет.

364

Цитомегаловирусная инфекция

Возбудитель цитомегаловирусной инфекции принадлежит к семейству Herpes-viridae (вирус герпеса человека 5), подсемейству бета, роду Cytomegalovirus (CMV — ЦМВ). Как и другие вирусы этого семейства, ЦМВ способен вызывать персистентную и латентную инфекцию и реактивироваться в условиях ослабления иммунитета. ЦМВ распространен повсеместно. От 0,5 до 2,5 % новорожденных инфицируются им в период внутриутробного развития, 10 % из них погибают в течение года. Инфицирование плода может вызвать нарушение функциональных механизмов дифференцировки клеток и тканей органов. Примерно 10— 60 % детей заражаются при прохождении через родовые пути и в первые 6 мес жизни через грудное молоко [Гришаев М.П., 1996].

Антитела IgM и IgG к цитомегаловирусу в сыворотке

Антитела IgM к цитомегаловирусу в сыворотке в норме отсутствуют.

В серологической диагностике ЦМВ инфекции используют много реакций, однако по-настоящему полезны те из них, которые могут выявить антитела, относящиеся к классам IgM и IgG.

Наличие антител IgM свидетельствует о свежем инфицировании или реактивации латентной и персистентной инфекции. Однако повышение антител класса IgM может не выявляться в течение первых 4 нед после начала заболевания. В то же время до 2 лет после выздоровления титры могут оставаться высокими. В связи с этим однократное определение уровня антител IgM бесполезно при оценке остроты инфекции. Важно наблюдать за изменением уровня антител IgM (нарастание их уровня или снижение). Наличие антител IgM у беременных является показанием для кордоцентеза и исследования крови плода на наличие антител IgM. При наличии антител IgM он считается инфицированным.

Известно, что 15—20 % вирусных гепатитов обусловлено поражением печени ЦМВ [Гришаев М.П., 1996]. Кроме того, продукты генов ЦМВ способны трансактивировать экспрессию HBs- и Cor-антигенов вирусного гепатита В. Поэтому, возможно, ЦМВ играет этиологическую роль в возникновении карцином печени. Установлена связь ЦМВ-инфек-ции с развитием сахарного диабета. ЦМВ поражает многие типы клеток крови и может пер-систировать в моноцитах, макрофагах, мегакариоцитах, что в ряде случаев приводит к тром-боцитопении.

Группой наибольшего риска для ЦМВ-инфекции являются лица с искусственной или естественной иммуносупрессией — ВИЧ-инфицированные, реципиенты органов, тканей, клеток, онкологические больные.

При оценке результатов выявления антител IgM следует учитывать, что наличие циркулирующих ревматоидных факторов может привести к ложноположительным результатам исследования.

Антитела IgG появляются в период реконвалесценции и у переболевших сохраняются до 10 лет. Частота выявления антител класса IgG может достигать 100 % среди различных групп населения.

Определение антител IgM и IgG к цитомегаловирусу. Диагностика острого периода цитомегаловирусной инфекции, в том числе при иммунодефицитных состояниях, СПИДе, лим-фопролиферативных заболеваниях.

Герпетическая инфекция

Герпесвирусы человека типа 1 (HSV-1) и типа 2 (HSV-2) характеризуются эффективным разрушением зараженных клеток, относительно коротким репродуктивным циклом и способностью пребывать в латентной форме в ганглиях нервной системы. Ранее считалось, что HSV-1 вызывает преимущественно назолабильный герпес, a HSV-2 — генитальный. В настоящее время установлено, что оба возбудителя вызывают герпетические поражения и той, и другой локализации. Генерализованный герпес чаще вызывает HSV-2. Основным методом диагностики герпетической инфекции в настоящее время является серологический — выявление антител к вирусу простого герпеса типа 1 и 2 в сыворотке.

365

Антитела к вирусу простого герпеса типа 1 и 2 в сыворотке

Антитела к вирусу простого герпеса обнаруживают у 80—90 % взрослых людей. В развитых странах Западной Европы генитальный герпес встречается в 7 раз чаще, чем сифилис, и занимает второе место среди инфекций, передающихся половым путем после трихомониаза. Однократное определение уровня антител к вирусу простого герпеса типа 1 и 2 в сыворотке не дает желаемых результатов. Важно наблюдать за динамикой уровня антител (нарастание их уровня или снижение). При острой инфекции или реактивации вируса нарастает уровень антител к вирусу простого герпеса типа 1 и 2. Пик титров антител к вирусу простого герпеса типа 1 и 2 в крови отмечают через 4—6 нед после развития клинической картины заболевания. Реинфекция у лиц с существующими до этого антителами не вызывает существенного изменения в титре антител даже при выраженной клинической картине.

Метод определения антител к вирусу простого герпеса типа 1 и 2 применяют для диагностики герпетической инфекции, в том числе при иммунодефицитных состояниях, СПИДе, лимфопролиферативных заболеваниях.

Корь

Возбудитель кори — polinosa morbillarum — относится к классу РНК-вирусов. Заболевают корью чаще дети дошкольного возраста. Однако лица, не болевшие корью, остаются высоко восприимчивыми к ней в течение всей жизни и могут заболеть в любом возрасте. Заболеваемость корью выше в холодный период года (с ноября по март); через каждые 2—4 года наблюдается подъем заболеваемости. Для лабораторной диагностики кори используют РТГА, РСК и метод иммуноферментного анализа.

Антитела IgM и IgG к вирусу кори в сыворотке

Антитела IgM к вирусу кори в сыворотке в норме отсутствуют.

Серологические методы исследования подтверждают диагноз, особенно стертые, атипичные формы. Наиболее часто используют РТГА и РСК. Специфическая диагностика является ретроспективной, поскольку в этих реакциях учитывают нарастание титра антител в парных сыворотках. Первую пробу крови берут не позже 3-го дня периода высыпаний, вторую — спустя 10—14 дней. Диагноз считается верифицированным только при нарастании титра антител в 4 раза и более. Метод иммуноферментного анализа выявляет антитела классов IgM и IgG.

Антитела IgM появляются в острый период инфекции (пик к 10-му дню) и могут сохраняться до 2 лет (обычно исчезают к 90-му дню). Вероятность выявления антител IgM в период высыпаний наибольшая. Антитела IgM определяют диагностику острого периода коревой инфекции. Ложноположительные реакции можно получить при хроническом активном гепатите, СКВ, инфекционном мононуклеозе.

Антитела IgG появляются в период реконвалесценции и у переболевших сохраняются до 10 лет. Появление антител IgG в конце острого периода заболевания является прогностически благоприятным признаком. С помощью антител IgG ретроспективно определяют диагностику кори и оценивают напряженность противокоревого иммунитета.

Вирусный паротит

Возбудитель эпидемического паротита относится к миксовирусам. Эпидемическим паротитом чаще болеют дети 3—10 лет. В распространении инфекции большое значение имеют бессимптомные формы эпидемического паротита. Частота этих форм составляет 21,8—88 % по отношению к общему числу инфицированных [Матковский B.C., Казанцев А.П., 1970]. Основным методом лабораторной диагностики эпидемического паротита является определение антител классов IgM к вирусу паротита в сыворотке.

Антитела IgM к вирусу паротита в сыворотке

Антитела IgM к вирусу паротита в сыворотке в норме отсутствуют.

Дети до 2 лет болеют эпидемическим паротитом редко, но затем заболеваемость возрастает и достигает пика к 5—9 годам. Диагностика основывается на клинической картине забо-

366

 

левания. Серологическое подтверждение острой инфекции может быть получено с помощью иммуноферментного метода, позволяющего определять антитела класса IgM. Антитела IgM появляются в острый период инфекции (в первые дни заболевания) и сохраняются до 2 лет [Казанцев А.П., 1988].

Антитела IgM к вирусу паротита применяют для диагностики острого периода паротита.

Ветряная оспа

Ветряная оспа и опоясывающий герпес — инфекционные болезни, вызываемые одним и тем же вирусом. Восприимчивость к ветряной оспе всеобщая, но главным образом поражаются дети от 6 мес до 7 лет. В типичных случаях заболевания, т.е. у большинства больных, диагностика заболевания основана на клинических данных. Для лабораторного подтверждения диагноза используют иммуноферментный метод.

Антитела IgM к вирусу ветряной оспы в сыворотке

Антитела IgM к вирусу ветряной оспы в сыворотке в норме отсутствуют.

Верифицировать диагноз можно используя метод иммуноферментного анализа, с помощью которого выявляют антитела класса IgM. Антитела IgM появляются в острый период инфекции и сохраняются до 2 лет.

Определение антител IgM к вирусу ветряной оспы необходимо для диагностики острого периода ветряной оспы.

Т-клеточный лейкоз

HTLV I и HTLV II (human T-lymphotropic virus) относятся к группе ретровирусов. Вирус HTLV I обнаруживают у больных Т-клеточным лейкозом, а вирус HTLV II — у больных так называемым волосатоклеточным лейкозом. Обе формы лейкоза характеризуются злокачественной трансформацией Т-лимфоцитов.

Т-клеточный лейкоз встречается спорадически в Европе и Северной Америке, а эндемическая форма — в южной части Японии и странах Карибского моря. Инфекция HTLV протекает как лихорадочное заболевание с обратимым процессом Т-клеточной пролиферации, лишь дополнительные транслокации приводят к злокачественной пролиферации. Вирус HTLV I повышает риск появления транслокаций. Выявление антител к вирусу Т-клеточного лейкоза помогает клиницисту в установлении этиологических причин лихорадки неясного генеза. У больных антитела появляются в конце острого периода заболевания, но не у всех. Различают две основные формы клеток при Т-клеточном лейкозе: клетки хелперы/индукто-ры (маркер CD4) или супрессоры/цитотоксические клетки (маркер CD8). Хелперный тип протекает как агрессивный лейкоз с высоким лейкоцитозом и относительно короткой продолжительностью жизни. Если клетки в основном несут маркер CD8, прогноз заболевания более благоприятен [Лысенко А.Я., 1995].

Современные эпидемиологические исследования показали смешанное присутствие обоих вирусов (HTLV I и HTLV II) среди различных групп населения, относящихся к группам высокого риска (частые внутривенные введения лекарств и состояние после трансфузий).

Антитела к вирусу Т-клеточного лейкоза (HTLV)

Антитела к вирусу Т-клеточного лейкоза в сыворотке в норме отсутствуют.

Для выявления антител к вирусам HTLV I и HTLV II используют иммуноферментные наборы, которые имеют высокую чувствительность и специфичность. Исследование скри-нинговое, и для подтверждения первично выявленных положительных результатов необходимо проведение иммуноблотинга.

HTLV вирус может быть возбудителем следующих заболеваний:

острые и хронические лейкозы;

острый и хронический лимфолейкозы;

Т-клеточная лимфома;

367

синдром Сезари;

волосатоклеточный лейкоз;

лимфаденопатии;

лимфопролиферативные заболевания.

Краснуха

Возбудитель краснухи относится к РНК-вирусам. Заболевание широко распространено во всех странах. Для серологической диагностики используют РТГА и ИФА.

Антитела IgG и IgM к вирусу краснухи в крови

Антитела IgG и IgM к вирусу краснухи в крови в норме отсутствуют.

Точный диагноз краснухи можно установить, либо выделив и идентифицировав вирус, либо на основании изменений титров специфических антител.

Специфические антитела в реакции торможения гемагглютинации можно обнаружить на 2-й день после появления высыпаний, причем их количество увеличивается в течение последующих 10—21 дня. Диагностическое значение имеет четырехкратный или больший подъем титра антител.

Для диагностики краснухи используют также иммуноферментный анализ на выявление специфических антител классов IgM и IgG. Динамика выявления антител при использовании иммуноферментного метода соответствует результатам реакции торможения гемагглютинации. Антитела IgM появляются в острый период инфекции. Наличие специфических антител класса IgM свидетельствует о недавно произошедшем заражении краснухой (в пределах 2 мес), однако в некоторых случаях они могут сохраняться до 1 года. На первом году жизни у детей с врожденной краснухой часто обнаруживают специфические антитела класса IgM, они могут исчезнуть на 3-м или 4-м году жизни. Определение антител класса IgM необходимо для диагностики острого периода заболевания.

Антитела IgG появляются в период реконвалесценции и у переболевших сохраняются до 10 лет и более. Определение антител класса IgG используется для оценки напряженности поствакцинального иммунитета и определения инфекции в анамнезе.

Грипп

Возбудители гриппа относятся к семейству ортомиксовирусов, включающих 3 рода вирусов гриппа: А, В, С. Вирусы гриппа содержат РНК и наружную оболочку, в которой размещены 2 антигена — гемагглютинин и нейрамидиназа, способные менять свои свойства, особенно у вируса типа А.

Антитела к вирусу гриппа А и В в сыворотке

Возбудитель заболевания точно идентифицируют посредством РСК или методом иммуноферментного анализа. При РСК исследование проводят в начале заболевания и через 5—7 дней, диагностическим считается нарастание титра антител не менее чем в 4 раза при исследовании парных сывороток.

По сравнению с РСК метод иммуноферментного анализа отличается большей чувствительностью. Как и при РСК, для использования в диагностических целях иммуноферментного анализа требуется сравнение уровня антител в пробах сыворотки, полученных от больных в начале и конце заболевания.

Определение уровня антител к вирусу гриппа А и В необходимо для диагностики острых респираторных вирусных инфекций, оценки напряженности поствакцинального иммунитета, диагностики гриппа А и В.

 

Парагрипп

 

 

Известно 4 типа вирусов парагриппа — 1, 2, 3, 4; все они относятся к РНК-вирусам. Выделение вируса в окружающую среду происходит в течение первой недели заболевания.

368

В межэпидемическое по гриппу время парагриппозные заболевания составляют до 15—30 % всех острых респираторных вирусных инфекций у взрослых. Точную идентификацию возбудителя заболевания проводят посредством РСК или методом иммуноферментного анализа.

Антитела к вирусу парагриппа 1, 2, 3, 4 в сыворотке

При РСК исследование проводят в начале заболевания и через 5—7 дней, диагностическим считается нарастание титра антител не менее чем в 4 раза при исследовании парных сывороток.

По сравнению с РСК метод иммуноферментного анализа отличается большей чувствительностью. Как и при РСК, для использования в диагностических целях иммуноферментного анализа требуется сравнение уровня антител в пробах сыворотки, полученных от больных в начале и конце заболевания.

Определение антител к вирусу парагриппа 1, 2, 3, 4 необходимо для диагностики острых респираторных вирусных инфекций, оценки напряженности поствакцинального иммунитета, диагностики парагриппа.

Аденовирусная инфекция

В настоящее время у человека выделено более 4,0 серотипов аденовирусов. Аденовирусные заболевания широко распространены как в виде спорадических случаев, так и в виде вспышек. Аденовирусными инфекциями чаще всего болеют младенцы и дети. Среди острых респираторных заболеваний в межэпидемическое время удельный вес аденовирусных инфекций колеблется от 3 до 20 %, во время вспышек может доходить до 80—90 % [Матков-ский B.C., Казанцев А.П., 1970].

Антитела к аденовирусам в сыворотке

Точную идентификацию возбудителя заболевания проводят посредством РСК или методом иммуноферментного анализа.

При РСК исследование проводят в начале заболевания и через 5—7 дней, диагностическим считается нарастание титра антител не менее чем в 4 раза при исследовании парных сывороток.

По сравнению с РСК метод иммуноферментного анализа отличается большей чувствительностью. Как и при РСК, для использования в диагностических целях иммуноферментного анализа требуется сравнение уровня антител в пробах сыворотки, полученных от больных в начале и конце заболевания.

Определение антител к аденовирусам применяется для диагностики острых респираторных вирусных инфекций, оценки напряженности поствакцинального иммунитета, диагностики аденовирусных инфекций.

Респираторно-синцитиальная инфекция

Респираторно-синцитиальный вирус относится к парамиксовирусам. Заболевание характеризуется преимущественным поражением органов дыхания (бронхиты, пневмонии). Респираторно-синцитиальный вирус является важнейшим возбудителем респираторных заболеваний у детей младшего возраста и частой причиной патологии нижних отделов дыхательных путей у младенцев.

Антитела к респираторно-синцитиальному вирусу в сыворотке

Точную идентификацию возбудителя заболевания проводят посредством РСК или методом иммуноферментного анализа.

При РСК исследование проводят в начале заболевания и через 5—7 дней, диагностическим считается нарастание титра антител не менее чем в 4 раза при исследовании парных сывороток, но этот метод менее чувствителен у детей в возрасте до 4 мес.

По сравнению с РСК метод иммуноферментного анализа отличается большей чувствительностью при выявлении уровня подъема антител у новорожденных. Как и при РСК, для использования в диагностических целях иммуноферментного анализа требуется сравнение

 

24-5812

369

уровня антител в пробах сыворотки, полученных от больных в начале и конце заболевания. Повышенный уровень антител при однократном исследовании может указывать на ранее перенесенную инфекцию. Повторная инфекция сопровождается повышением уровня антител при исследовании в динамике.

Определение антител к респираторно-синцитиальному вирусу необходимо для диагностики острых респираторных вирусных инфекций, оценки напряженности поствакцинального иммунитета, диагностики аденовирусных инфекций.

Инфекционный мононуклеоз

Вирус Эпштейна—Барр — вирус из группы герпеса, обладает тропизмом к В-лимфоци-там, длительно персистирует в клетках хозяина в виде латентной инфекции. Вирус Эпштейна—Барр вызывает заболевание — инфекционный мононуклеоз, который широко распространен во всем мире. С вирусом Эпштейна—Барр связывают этиологию и лимфомы Бер-китта. Лабораторные исследования в зависимости от применяемых методов позволяют выявить антитела различного класса.

Антитела к вирусу Эпштейна—Барр в сыворотке

Из серологических методов диагностики заболевания наиболее распространена реакция Пауля—Буннелля, направленная на выявление гетерофильных антител в сыворотке. Диагностический титр — 1:32 и выше. Антитела к эритроцитам барана называют гетерофильными антителами, которые можно обнаружить у 50 % детей, у 90—95 % подростков и взрослых с мононуклеозом. Если исследование проводят в 1-ю неделю заболевания, то у 10—15 % пациентов с мононуклеозом результаты могут быть отрицательными. Если клиническая картина сходна с таковой при инфекционном мононуклеозе, то исследование на наличие гетерофильных антител следует повторить на 2-й или 3-й неделе заболевания. Уровень гетерофильных антител снижается по окончании острого периода инфекционного процесса, однако их титр можно определить в течение 9 мес после появления клинических симптомов. На смену методу определения антител к эритроцитам барана с титрованием в пробирке пришел метод «одного пятна», который более чувствителен и специфичен.

Следует отметить, что спектр выпускаемых фирмами диагностических тест-систем, основанных на определении титра антител, очень широк, поэтому необходимо ориентироваться на диагностический титр антител, указанный в инструкции к системам.

Если гетерофильные антитела не выявляются, а клиническая картина соответствует инфекционному мононуклеозу, надо исследовать сыворотку крови на специфические антитела IgM и IgG в ИФА. Диагностическим критерием первичной инфекции является обнаружение антител класса IgM, представляющих собой антитела к антигену вирусного капсида. Антитела IgM появляются в острой стадии заболевания и исчезают через 1—3 мес. Практически у всех пациентов, перенесших инфекционный мононуклеоз, имеются антитела, относящиеся к IgG (также антитела к капсидному антигену вируса), которые сохраняются пожизненно. Вследствие этого антитела из IgG целесообразно использовать главным образом в качестве ретроспективного критерия инфицирования вирусом Эпштейна—Барр, но нельзя применять для диагностики первичной инфекции.

Определение антител к вирусу Эпштейна—Барр необходимо для диагностики инфекционного мононуклеоза и хронических инфекций, вызванных вирусом Эпштейна—Барр.

Антитела к вирусу Эпштейна—Барр можно выявлять при вторичных иммунодефицит-ных состояниях, в том числе СПИДе, карциноме носоглотки, лимфоме Беркитта.



Страница: | 1 | 2 | 3 | 4 | 5 | 6 | 7 | 8 | 9 | 10 | 11 | 12 | 13 | 14 | 15 | 16 | 17 | 18 | 19 | 20 | 21 | 22 | 23 | 24 | 25 | 26 | 27 | 28 | 29 | 30 | 31 | 32 | 33 | 34 | 35 | 36 | 37 | 38 | 39 | 40 | 41 | 42 | 43 | 44 | 45 | 46 | 47 | 48 | 49 | 50 | 51 | 52 | 53 | 54 | 55 | 56 | 57 | 58 | 59 | 60 | 61 | 62 |

Оцените книгу: 1 2 3 4 5

Добавление комментария: